本书以微生物的一般实验方法为基础，结合环境微生物学的实验教学要求，从微生物分离筛选、培养、一般鉴定方法、环境因子对微生物影响以及环境监测等，由25个独立实验构成，内容包括实验器具灭菌消毒，培养基配制，显微镜使用，细菌染色与形态结构观察，细胞大小和数量测定等基础方法。根据近年环境微生物学及其实验手段飞速发展的特点，特别编著了环境中活的但非可培养（VBNC）状态细菌优势菌种的分离，厌氧细菌的一般分离与培养，微生物菌种的一般保藏与恢复培养，土壤以及活性污泥中微生物总DNA的抽提，16SrRNA基因PCR扩增与系统树，DGGE解析法；结合环境微生物的检测实验，安排了环境因子对微生物生长的影响，微生物对有机物的降解与转化，水中细菌总数与大肠菌群的检测，活性污泥的生物相观察以及样品致突变毒性检测的Ames实验，力求体现环境微生物学前沿性和创新性的特点。对编撰的实验项目可以根据实际教学要求增减或合并。

　　环境微生物学以微生物学为基础，利用微生物在环境污染治理、环境生态修复中的特殊地位与作用，已经成为当代环境科学发展、涉及多学科和跨学科的现代生命科学的前沿学科之一。在过去的几十年中，由于环境生态污染加剧，人们对环境中微生物群体结构以及多样性特征的认识不断深化，因此对实验方法和技术手段也需不断更新与完善。
　　根据一般环境微生物学实验的教学要求，本书编写了环境微生物的分离筛选、培养保存、形态观察和一般鉴定方法，环境因子对微生物生长的影响以及在环境监测中的微生物学实验手段等基础实验。近年，人们对环境微生物认知逐渐加深，迫切需要创新科学实验手段的支持，为此，在微生物学实验的基础上增加了分子生物学等实验，编写有土壤以及活性污泥中微生物总DNA的抽提，16SrRNA基因的PCR扩增与系统树构建，DGGE法对微生物群集组成的解析。基于环境微生物总量的90%以上处于未培养与活的但非可培养（VBNC）状态的认识，设计了利用Rpf信号蛋白分子对VBNC细菌优势菌种的复苏与促进生长、提高分离丰度的探索性实验方法，力求体现环境微生物学实验前沿性和创新性的特点。
　　本书由浙江师范大学地理与环境科学学院多年从事教学、科研及实验指导的教师陈建荣、丁林贤和盛贻林编写。由盛贻林、丁林贤负责内容整理与编排等工作，陈建荣教授对全书进行了统稿、审核和定稿。
　　由于编者水平有限和时间仓促，书中不妥之处在所难免，热忱希望读者谅解并批评指正。
　　编者
　　2016年3月

前言
第一部分 环境微生物实验基本操作及注意事项
第二部分 环境微生物实验
实验一 普通光学显微镜的使用
实验二 培养基的制备及灭菌
实验三 细菌的革兰氏染色与形态结构观察
实验四 细菌的芽孢、鞭毛、荚膜染色法
实验五 真菌的形态结构观察
实验六 放线菌的形态结构观察
实验七 微生物细胞大小和数量测定
实验八 无菌操作及接种技术
实验九 土壤中微生物的分离与纯化培养
实验十 环境样品中优势菌种的分离与计数
实验十一 环境样品中未培养VBNC资源细菌的分离
实验十二 厌氧细菌的一般分离与培养
实验十三 酵母菌的加富培养与分离
实验十四 微生物菌种的一般保藏号恢复培养
实验十五 土壤中微生物总DNA的提取
实验十六 活性污泥中微生物总DNA的提取
实验十七 细菌DNA琼脂糖凝胶电泳实验
实验十八 细菌16S rRNA基因的PCR扩增技术
实验十九 DGGE法解析环境样本中微生物的多样性
实验二十 环境因子对微生物生长的影响
实验二十一 微生物对有机物的降解与转化
实验二十二 微生物对含氮化合物的转化
实验二十三 水中细菌总数与大肠菌群的检测
实验二十四 活性污泥及其生物相的观察
实验二十五 样品致突变毒性检测Ames实验
第三部分附录
附录一 常用培养基及其配制法
附录二 常用染色液的配法
附录三 常用染色方法
附录四 MPN表
参考文献