臭灵丹[Laggera Pterodonta(DC.)Benth.]为菊科六棱菊属药用植物,别名狮子草、臭叶子、六棱菊等,又有“灵丹草”之称。在我国主产于云南省,是民族民间习用药,药源丰富,具有悠久的使用历史和广泛的药用价值,被广泛用于治疗感冒、咽喉炎、支气管炎、疟疾等病症。
第1章 臭灵丹的基源和栽培种植
1.1臭灵丹的植物基源
臭灵丹[LaggeraPterodonta(DC.)Benth.]别名狮子草、臭叶子、六棱菊、野辣烟、归经草、鱼富有,始载于《滇南本草》,为菊科植物翼齿六棱菊的干燥地上部分¨。本属植物约20多种,分布于非洲热带及亚洲东南部,我国有3种,分别为六棱菊、假六棱菊和翼齿六棱菊,广布于云南、四川等地,为一年生或多年生草本植物,云南仅有六棱菊和翼齿六棱菊这两种。在云南民间,臭灵丹作为抗菌消炎、清热解毒的良药,一直被用来防治感冒、咽喉炎、支气管炎、疟疾等;同时,也作为外敷药用来治疗疥疮、肿毒、烧烫伤、毒蛇咬伤、跌打损伤等[2]。本品性寒、味苦[3]。夏秋采收,洗净,鲜用或晒干。从《滇南本草》书中可知,管氏医家长期在云南行医,他们吸收、发掘、应用、提高了许多民族民间的医药经验,如臭灵丹草以往民间外用居多,而管浚首先采用内服治疗伤风感冒,其口诀是“四时伤风热咳痛,臭灵丹草水煎用,风寒葱姜发汗出,风热石膏显神通。”据20世纪70年代记载,赤脚医生曾用臭灵丹草的水煎液过滤后直接注入腮腺炎患者的皮下组织,消炎速度快且彻底[4]。在对臭灵丹草多次野外考察中发现,它白煞分布植株有阔叶和狭叶两个生态型[5]。
臭灵丹在不同的民族有不同的叫法,阿吕族:郎呢(意泽);白族:粗烟筛;傣族:牙郎艳(德傣);娜油、腊溜、粘美丹(西傣);德昂族:芒毕;景颇族:Dijvepjing;拉祜族:臭灵丹:佤族:RIBAEDU、阿堵;彝族:松那薄;壮族:奈痛(云南文山)[6]。每个民族的药用炎症又有所区别,阿吕族用于感冒、咽喉炎、支气管炎、疟疾;白族用全草,用于感冒、流感、中暑、口腔炎、扁桃体炎、咽喉炎、中耳炎、支气管炎、疟疾;外用疮疖、肿毒、烧烫伤、毒蛇咬伤、跌打损伤、骨折;傣族(德傣)用于感冒、咽喉炎、支气管炎、疟疾;(西傣)用全草,用于伤风感冒、咳嗽、百日咳、哮喘、腮腺炎、淋巴结炎;拉祜族用全草,用于咽喉炎、气管炎、烫烧伤(外用)、恶疮肿毒(外用)、牙齿痛;佤族用根、叶,用于腹部热痛、尿黄、尿少、尿道感染、上呼吸道感染、扁桃体炎、咽喉炎;彝族用全草,用于胃寒食滞、脘腹冷痛、瘀血肿痛、痈疡疮疖;壮族用全草,用于风热感冒、咽喉肿痛、肺热咳嗽、急性牙周炎、扁桃腺炎、中耳炎、腮腺炎[6]。
民族药臭灵丹的历史背景[7]:彝族草药灵丹草,只要有点土就能活,路边田埂随处可见,用来清咽利喉,倮管见效,似乎是生得贱的缘故,人们叫它“臭灵抗病毒植物药臭灵丹”。《中药大辞典》记载:“臭灵丹是民间用药,为菊科植物,多年生草本,高0.2-2m,全体密被绿色头状腺毛,有强烈的特殊臭气”。但据专家称,其实这种草药的气味只是淡淡的,并不强烈,有些人还喜欢闻它。也许只是人们早已喊惯叫惯,已约定成俗。早在《滇南草经》里就有臭灵丹的记载。《植物名实图考》卷十一隰草类飞廉项下载:“余至滇,见土人习用治寒热毒疮,以臭灵丹为要药,园圃中多有之,就而审视,乃飞廉也 《滇本草》虽别名臭灵丹,而主治与《本草》、《别录》同而加详 余既喜见诸医所未见,又以此草本生河内,乃中原弃而不用,边陲种人藉手祛患,物固有屈于彼而伸于此者。”《滇南本草图谱》谓:“《植物名实图考》以草之飞廉,疑非是。本种在国内产于滇省及西康,非若陶隐居所说处处有之。”1977年版的《中国药典》将该药材收载其中,于是臭灵丹之名更为广传。
另外,臭灵丹有一定毒性。2015年版《中国药典》中161种清热解毒类中药制剂处方中,涉及的含毒性中药29种,其中臭灵丹草属于有毒药材11种中的一种[8]。
1.2臭灵丹的栽培种植
臭灵丹草属于六棱属植物,隶属于菊科(Compositae),亦称六棱菊属[9],在乡间的路边房角、荒坡野地,常见一种野生植物:茎上长着四条带状窄叶,使它的茎秆看起来像四棱形,在茎秆的叶腋间又长出一些分枝,每到春天,枝头就会开着白色的小花,这种植物的叶呈椭圆形,叶面有一层油状分泌物,有点沾手,触摸后嗅到一股淡淡的臭味,所以叫臭灵丹[10]。
从氨基酸总量、必需氨基酸含量、必需氨基酸组成及配比、药效氨基酸含量、必需氨基酸比值系数分综合评价看,臭灵丹中蛋白质具有很高的营养保健价值[11]。目前,市场上销售的臭灵丹草药主要来白于野生资源,由于它疗效确切,用量逐年增加,野生资源已经不能满足市场需求,因此,只有通过人工种植才能保护臭灵丹草野生资源,实现臭灵丹草的可持续利用。要进行人工种植首先要解决种植繁育技术问题,臭灵丹草主要通过种子进行繁殖,其种子较小,干粒重仅为0.04-0.079,常因育苗方法不当,导致出苗率低,无法满足生产需求。
专利[12]发明的臭灵丹草的种植栽培技术可实现臭灵丹草药的可持续利用。
1.2.1臭灵丹的栽培
1.准备苗床
选择土层深厚、土质疏松、肥沃的砂壤土地块作为育苗地,清除地中的杂质、残渣,每亩施用腐熟农家肥1500-3000kg和市售,复合肥15-20kg,深翻30cm,并耙平土壤,按低墒高埂做苗床,苗床宽1.0-1.2cm,埂宽40cm.埂高6-10cm,床面上撒3cm厚直径小于2mm的砂壤土,并整平。
2.种子处理
种子用35-40℃的温水浸泡24h,滤去水后将其与湿润细砂按体积比1:10的比例混合均匀。
3.播种
播种前一天用水将苗床充分浇透,将处理好的种子,均匀撒播在苗床上,播后覆盖1-3mm厚的细土,在苗床上盖1-2cm厚的松针或碎草,浇透水,塔高为60cm的透明塑料薄膜拱棚。
4.苗期管理
播后根据苗床土壤墒适时浇水,保持苗床土壤润湿,杂草高1-2cm时及时拔除,出苗后揭去覆盖的松针或碎草,苗出齐后拔除弱苗、病苗:当有4-5片真叶时掀开拱棚两端薄膜进行炼苗。炼苗6-8天后,揭去拱棚膜。
5.种苗移栽
灵丹草苗有6-8片真叶时选择壮苗进行大田移栽。
1.2.2组培[5]
考虑到外界环境难以控制,最终找到可以使臭灵丹外置生长为臭灵丹组培苗的再生体系(见图8-6)。
1.用到的培养基
(1)扩繁培养基(每升):MS+NAA(0.2mg/L)+3%葳糖+琼脂7.59pH:6.0
(2)诱导愈伤培养基(每升):MS+6-BA(2mg/L)+NAA(0.5mg/L)+3%蔗糖+琼脂7.59pH:6.0
(3)分化培养基(每升):MS+6-BA(4mg/L)+NAA(0.5mg/L)+3%蔗糖+琼脂7.59pH:6.0
2.种子培育
每年的11月到12月,采集元谋县的臭灵丹种子,将臭灵丹种子先铺放在有潮湿滤纸的培养皿中催芽,培养皿放置在中国科学院昆明植物研究所植化室温室的花盆中,温度约在25-30℃,光照即为昆明6-7月的白然光照,给予充足的水分,待其生长大概12周,臭灵丹约有10片功能叶时进行实验。
3.组培苗培育
用臭灵丹幼嫩茎尖顶端作为外植体,通过初代培养、继代增殖、生根培养和快速扩繁建立臭灵丹离体培养体系。从温室采集的外植体,放置在实验室里用清水漂洗一小时;然后拿到组培室无菌操作台上用75%(v/v)的酒精进行表面消毒0.5min,再用无菌水漂洗3次;最后用0.1%(V/V)HgCl2进行消毒,再用无菌水漂洗5次。然后,将这些表面消毒好的外植体切成1cm长的小段,移植到初代培养基上,Murashinge-Skoog(MS)培养基+6-benzylaminopurine(6-BA)2.0mg/L+a-naphthlceticacid(NAA)0.5mg/L。培养基放置在25℃的黑暗环境下培养两周,移植到继代增殖培养基上:MS培养基+6-BA(4.0mg/L)+NAA(0.5mg/L),25℃下光周期为每天16h的环境下培养3周。最后移植在生根培养基上:IMS培养基+6-BA(4mg/L)+NAA(O.2mg/L)进行生根培养。25℃下光周期为每天16h的环境下培养6周,待其生根长成组培苗。然后从臭灵丹组培苗上剪取含有腋芽的茎段,约2cm长,移植到扩繁培养基上进行繁殖。25℃下光周期为每天16h的环境下培养6-8周,待其长成6-8cm高的组培苗时可用来实验。
4.注意
所有的操作都要求在无菌环境下,所有的培养基都加入了琼脂7.5g/L和蔗糖3.0g/L。用NaOH调节pH5.6-5.8,所有的培养基都在121℃和1.1kg/cm2压力的高压锅中灭菌20min。
1.2.3臭灵丹对重金属的富集
文献13]通过采用火焰原子吸收法检测了臭灵丹对重金属Pb、Cu、Zn及Ni的富集含量,得出结论:臭灵丹生长适应能力强、亩产量高,臭灵丹叶对Pb富集系数及臭灵丹的茎对Ni的富集系数>1,臭灵丹对Pb、Cu、Ni、Zn的转运系数均>1。综合分析,臭灵丹具有开发为Pb、Ni污染的植物修复的主体植物的潜质。土壤环境、气候环境等因素对植物的富集特性有一定的影响,虽然臭灵丹对Pb、Cu、Ni、Zn圆种重金属的富集系数的影响因素有待进一步考察,但是总的来说臭灵丹具有开发为Pb、Ni污染的植物修复的主体植物的潜质。
第2章 臭灵丹的生药学鉴别
2.1植物形态特征与特性
臭灵丹,草本。茎直立,粗壮或细弱,上部分枝,高达1m,基部径约5mm,具沟纹,疏被短柔毛或杂有腺体,或有时无毛,茎翅连续或有时间断,宽不超过2mm,有不整齐的粗齿或细齿,节间长1-3cm。中部叶倒卵形或倒卵状椭圆形,稀椭网形,无柄,长7-10cm,宽2-3.5cm,基部长渐狭或渐狭,沿茎下延成茎翅,顶端短尖或钝,两面疏被柔毛和杂以腺体,中脉和7-10对侧脉在下面稍凸起,网脉略明显;上部叶小,倒卵形或长圆形,长2-3cm,宽5-10cm,顶端钝或短尖,边缘锯齿较小。头状花序多数,径约10mm,在茎枝顶端排列成总状或近伞房状的大型圆锥花序,花序梗长约2cm,无翅,密被腺状短柔毛;总苞近钟形,长约8mm;总苞片约7层,外层绿色或中部以上绿色,叶质或基部之边缘干膜质,长网形或长网状披针形,长4~5mm,顶端短尖,背面被腺状短柔毛,内层上部有时紫红色,干膜质,线形,长6~8mm,顶端渐尖,背面脊处被腺状短柔毛或无毛,最内层极狭,通常丝状。雌花多数,花冠丝状,长约7mm,顶端有4-5小齿。两性花约与雌花等长,花冠管状,向上渐扩大,檐部通常5裂,裂片卯状或卵状渐尖,背面有乳头状突起。瘦果近纺锤形,有10棱,长约10mm,被白色长柔毛。冠毛白色,易脱落,长约6mm。花期4~10月[1]。生于海拔200~2400m的山野、路旁、山坡、田梗上[2]。
在我国,臭灵丹主要产于云南的迪庆、西双版纳、昆明、大理、丽江、楚雄、思茅等地区[3]。四川、湖北西部、贵州及广西西南部也有分布,生于空旷草地上或山谷疏林中,国外主要分布于印度、中南半岛及非洲热带地区[1]。
2.2性状鉴别
臭灵丹呈短节状,茎圆形,直径0.3~1cm;具5-8列不规则缺刻的翅:多分枝;有细纵纹,密被绒毛,表面呈灰绿色或紫棕色。质硬而脆,折断面黄白色或略带绿色,髓部类白色,约占直径。叶片多皱缩破碎或脱落,少有完整者,呈灰绿色,密被众多绒毛。具有特殊的臭气,味苦、辛。以色绿,叶多、气浓者为佳[2]。
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