分子生物学的飞速发展已渗透到医学研究和应用的各个领域，并派生出了一门全新的学科——分子医学。分子医学的出现犹如分子生物学对于生命科学之伟大意义，将全面更新传统医学的模式，并开拓出医学发展的新潮流。所以，无论是正处于医科学习阶段的青年学生，还是已翱翔在医学领域的广大医学工作者，对这一新型学科的领略或贯通已是势在必行。

　　顺应这一新的形势，中山大学北校区在学校专项基金的投入下，建立了设备先进、设施完善的“分子医学教学实验室”，并对基础医学教育中一部分沿袭多年的实验课程进行全新的综合和改进，创建了一门集分子生物学基本技能和医学应用于一体的全新的系统化实验课程——分子医学技能。本教材便是配合该新课程而编写的。

　　分子医学的主体内容是分子生物学在医学中的应用，既涵盖了其主要的理论和技术体系，又侧重于医学领域中的应用，其中的技术体系是开展该领域研究的核心内容。因其涉及面极其广泛又错综复杂，众多的技术原理和细节常常会令学子们迷惘而难以融会贯通。本书集编者多年从事医学分子生物学教学和科研之经验与教训，力求以全面系统的框架、简明扼要的文字、形象易懂的图表，把分子医学的基本轮廓和主要技术系统疏理成册，奉献于窳。全书共分七篇，以分子医学概论为引导；第一篇为核酸技术；第二篇为蛋白质技术；第三篇和第四篇为免疫分析技术和细胞培养技术，是本书的主体内容，包括了分子生物学和分子免疫学中最实用的技术原理和操作细节，叙述详尽，对从事相关实验操作极有帮助；第五篇概述了近年出现的分子医学前沿技术；第六篇简要介绍了分子医学技术在医学中的应用；第七篇为分子医学技术数据库。

　　分子生物学的诞生被认为是第三次技术革命的标志之一，而分子医学又将生物医学推向了一个崭新阶段。愿本书能对大家在最短的时间内系统地掌握分子医学这门前沿学科的基本理论和技能有所帮助，在不断发展的医学领域中具备更大的适应力和竞争力。

　　“分子医学技能”课程的创建和本教材的编写都是在中山大学各级管理部门的大力支持下完成的，尤其是实验室与设备管理处林明河处长、基础医学院主管教学的吴忠道副院长；汪华侨教授一直以来关注并亲自指导这一工作的进行，付出了大量心血；实验教学中心潘实清主任、颜少平副主任、教学科朱敬欢科长、前期工作的林达老师和曹开源老师等，都为此付出了艰辛劳动；本实验室的骆晓枫、黄小荣、谢金卫等技师为本书的文字编辑和校对等做了大量工作。愿我们的没有白费，愿这一新型课程的开展和新编教材的出版能为广大学子的学习和工作提供有益的帮助，那将是我们所能得到的最有价值的报答！

前言

本书内容说明

分子医学概论

1 疾病的分子机制

2 疾病的基因诊断

3 疾病的基因治疗

4 疾病的基因预防

5 分子医学技术

6 分子医学的社会、伦理问题

7 分子医学在现代医学发展中的意义

7．1 分子医学使临床思维方式不断更新

7．2 分子医学促进实验医学和经验医学的融合

7．3 分子医学加快了医学教育的改革

主要参考文献

第一篇 核酸技术

第1章 核酸制备与扩增

1．1 基因组DNA的提取与纯化

1．1．1 原理

1．1．2 材料

1．1．3 实验方案

1．1．4 常见问题及可能原因

1．2 RNA的提取和cDNA合成

1．2．1 原理

1．2．2 实验方案

1．2．3 注意事项

1．3 聚合酶链反应（PCR）

1．3．1 PCR技术原理

1．3．2 材料

1．3．3 方案

1．3．4 注意事项

第2章 核酸的检测

2．1 电泳分析法

2．1．1 原理

2．1．2 材料

2．1．3 DNA的琼脂糖凝胶电泳的实验方案

2．1．4 注意事项

2．1．5 结果讨论

2．2 分光光度分析法

2．2．1 原理

2．2．2 紫外光谱分析法检测DNA含量

2．2．3 分光光度法检测RNA浓度

第3章 核酸杂交与核酸探针

3．1 概论

3．1．1 探针的种类

3．1．2 标记物的选择

3．1．3 核酸探针标记的方法

3．1．4 几种常见的杂交方法

3．2 核酸探针与杂交常规实验

3．2．1 核酸探针的制备和标记

3．2．2 原位杂交法进行重组质粒的筛选

3．2．3 Southern杂交

3．2．4 Northern杂交

第4章 基因克隆

4．1 分离目的基因和基因载体

4．1．1 概论

4．1．2 目的基因的获取

4．1．3 质粒制备的常规方案

4．2 限制性内切核酸酶切割目的基因和基因载体

4．2．1 概论

4．2．2 限制性内切核酸酶的酶切与鉴定

4．3 目的基因和基因载体的体外连接

4．3．1 概论

4．3．2 载体与目的基因的连接

4．4 重组DNA转化宿主细胞

4．4．1 概论

4．4．2 重组DNA转化大肠杆菌

4．5 重组体阳性克隆的筛选

4．5．1 概论

4．5．2 实验方案

4．6 外源基因在宿主细胞中的表达

4．6．1 概论

4．6．2 在大肠杆菌中表达蛋白产物

主要参考文献

第二篇 蛋白质技术

第5章 蛋白质样品的制备技术

5．1 蛋白质样品的预处理

5．2 细胞的破碎

5．2．1 机械方法

5．2．2 物理方法

5．2．3 化学及生物化学方法

5．3 蛋白质的提取

5．3．1 水溶液提取法

5．3．2 有机溶剂提取法

5．3．3 表面活性剂的利用

5．3．4 提取过程中的蛋白质保护

5．4 蛋白质的分离纯化

5．4．1 根据蛋白质溶解度不同的分离方法

5．4．2 根据蛋白质分子质量大小不同的分离方法

5．4．3 根据蛋白质带电性质进行分离

5．4．4 根据配体特异性的分离方法——亲和层析法

5．5 蛋白质浓缩、干燥和保存

5．5．1 蛋白质的浓缩

5．5．2 蛋白质的干燥

5．5．3 蛋白质的储存

第6章 蛋白质定量检测技术

6．1 紫外（UV）吸收测定法

6．1．1 实验原理

6．1．2 试剂和设备

6．1．3 操作方法

6．1．4 注意事项

6．2 Folin-酚试剂法（Lowry法）

6．2．1 基本原理

6．2．2 试剂和设备

6．2．3 操作步骤

62．4 注意事项

6．3 考马斯亮蓝法（Bradford检测法）

6．3．1 基本原理

6．3．2 试剂与设备

6．3．3 操作步骤

6．3．4 注意事项

6．4 二喹啉甲酸（BCA）检测法

6．4．1 基本原理

6．4．2 试剂与设备

64．3 操作步骤

64．4 注意事项

第7章 蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

7．1 聚丙烯酰胺凝胶的合成和结构

7．2 聚丙烯酰胺凝胶浓度和孔径的选择

7．3 不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理

7．4 实验材料和试剂

7．5 实验步骤

7．5．1 SDS-聚丙烯酰胺凝胶的灌制

7．6 胶的染色及处理

7．6．1 用考马斯亮蓝对SDS-聚丙烯酰胺凝胶进行染色

7．6．2 用银盐对SDS-聚丙烯酰胺凝胶进行染色

7．6．3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶的干燥

7．7 注意事项

附：圆盘电泳

材料

操作

第8章 蛋白质的免疫印迹技术

8．1 蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺电泳

8．2 蛋白质从凝胶转移至膜上

8．2．1 基本原理

8．2．2 试剂与器材

8．2．3 操作步骤

8．2．4 注意事项

8．3 蛋白质转移膜的免疫检测

＆3．1 基本原理

8．3．2 试剂

8．3．3 操作步骤

8．4 免疫印迹后膜的重复使用

8．4．1 消除缓冲液（100ml）

8．4．2 操作步骤

8．5 免疫印迹中需要注意的问题

8．5．1 抗体的性质与使用

8．5．2 样品中待检测蛋白质的含量

8．5．3 背景问题

8．5．4 转印效率低

8．5．5 设置对照与解释结果

8．5．6 免疫印迹技术的灵敏度

第9章 蛋白质层析技术

9．1 层析的基本概念

9．2 层析的基本理论

9．3 层析法的分类

9．4 柱层析的基本装置及基本操作

9．4．1 柱层析的基本装置

9．4．2 柱层析的基本操作

9．5 几种常见的蛋白质层析技术

9．5．1 凝胶层析

9．5．2 离子交换层析

9．5．3 亲和层析

9．5．4 高效液相色谱法

附：实验

实验一 血清-球蛋白的分离纯化（分子筛层析法）

实验二 血清蛋白质的分离（离子交换层析法）

实验三 凝胶层析法分离蛋白质

主要参考文献

……

第三篇 免疫分析技术

第四篇 细胞培养技术

第五篇 分子医学前沿技术

第六篇 分子医学技术在医学中的应用

第七篇 分子医学技术数据库