《现代生命科学实验系列丛书：实用细胞生物学实验》是一本内容内富、编排新颖、语言通俗易懂的细胞生物学实验教材。内容包括三大部分：第一篇为细胞生物学现代仪器介绍，主要介绍细胞生物学实验所涉及的一些先进的实验仪器的原理与使用领域、使用方法；第二部分为细胞生物学常用实验技术，包括细胞制片技术，细胞分离、纯化技术，免疫组化技术等；第三部分为实用细胞牛物学实验，内容涵盖了细胞结构与组成、细胞分离、细胞组分分离、细胞生理与病理、细胞遗传、细胞培养与细胞工程等精选的代表性实验，特点是用时较短、步骤翔实、结果可控、能够在正常教学时间段完成、看用作日常教学学生实验。
《现代生命科学实验系列丛书：实用细胞生物学实验》主要针对高等院校生物学相关专业本科生细胞生物学实验教学编写，可用作教师及学生的细胞生物学实验教材或参考书。
丛书序
丛书前言
前言
第一篇 细胞生物学现代仪器介绍
第1章 相差显微镜的工作原理及应用
第2章 透射电子显微镜的原理及其在细胞生物学中的应用
第3章 流式细胞仪原理及应用
第4章 激光扫描共聚焦显微镜原理及应用
第二篇 细胞生物学常用实验技术
第5章 细胞制片技术
第6章 细胞分离纯化技术
第7章 细胞培养技术
第三篇 实用细胞生物学实验
一、细胞结构与组成显示实验
实验1 动物细胞血涂片的制备、瑞氏染色及细胞观察
实验2 细胞大小的显微测量
实验3 线粒体及液泡系的活体染色
实验4 甲基绿一派洛宁染色法显示细胞中的DNA和RNA
实验5 洋葱鳞茎内表皮细胞DNA的福尔根显示
实验6 细胞中多糖和脂肪的染色显示
实验7 考马斯亮蓝染色法显示细胞骨架
实验8 免疫荧光染色法显示培养细胞的微管
实验9 巨噬细胞酸性磷酸酶的显示
实验10 细胞中过氧化氢酶的显示
二、细胞分离实验
实验11 聚蔗糖一泛影葡胺密度梯度分离液分离血液单个核细胞
实验12 Percoll不连续密度梯度离心法分离NK细胞
三、细胞组分分离实验
实验13 红细胞质膜的制备
实验14 肝细胞质膜的制备
实验15 植物叶绿体的分离、观察及活性检测
实验16 动物肝组织线粒体的分离实验
实验17 大豆叶片细胞线粒体的分离纯化
实验18 细胞中期染色体的分离
四、细胞生理与病理检测实验
实验19 哺乳动物红细胞膜的通透性
实验20 质壁分离法测定植物基态渗透值
实验21 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察及吞噬活性检测
实验22 台盼蓝（trypan blue）染料排除法鉴定死活细胞
实验23 MTT比色法检测细胞活力与细胞数量的关系
实验24 涂片染色法观察骨髓自然凋亡细胞
实验25 Hoechst-PI染色法检测抗癌药物诱导的腹水瘤凋亡细胞
实验26 Annexin V-FITC/PI双染色法检测凋亡细胞
实验27 细胞微核检测实验
五、细胞染色体制备与分析实验
实验28 压片法制备植物根尖细胞有丝分裂标本
实验29 花粉母细胞减数分裂标本制备
实验30 压片法制备动物精巢组织减数分裂染色体标本
实验31 滴片法制备动物单细胞悬液染色体标本
实验32 去壁低渗法制备植物细胞染色体分散标本
实验33 人类染色体的G显带实验
实验34 植物根尖染色体的Giemsa C显带实验
实验35 人类染色体核型分析实验
六、细胞培养相关实验
实验36 鸡胚成纤维细胞的原代培养实验
实验37 外周血淋巴细胞的原代培养实验
实验38 鸡胚成纤维细胞的传代培养实验
实验39 腹水瘤细胞冻存与解冻复苏实验
实验40 植物原生质体的制备与培养实验
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附录 缩略语对照表
第7章 细胞培养技术
细胞培养是指在体外模拟细胞体内生长的条件，使细胞在体外生长、繁殖的过程。相对于细胞在体内的生长，体外培养过程条件可控、干扰因素少，可以提供大量均一的细胞样品供研究及生产使用，已广泛用于生物学的各个领域，如细胞生物学、分子生物学、遗传学、医学、药理学、免疫学、细胞工程、老年学、肿瘤学等。
7.1 细胞培养的一般知识
7.1.1 原代培养和传代培养
细胞培养根据材料来源分为原代培养和传代培养。原代培养（primaryculture）就是从生物体取材进行的第一次培养，并且在中途不分割培养物、不更换培养物的生长器皿。传代培养（passaging or splitting culture）是将培养物分割成小的部分，重新接种到新的培养器皿内再进行培养的过程。原代培养的细胞往往组成复杂、生长缓慢，但是更能代表所来源的组织细胞类型和表达组织的特异性特征，可用于药物测试、细胞分化及病毒学等方面的研究。传代培养的细胞可以进行细胞克隆，形成的细胞株易于保存，可提供大量一致、持久的实验材料。
7.1.2 细胞体外培养要求的条件
1）严格无菌环境
微生物比动植物细胞繁殖速度快得多，一旦有微生物污染，细胞培养将无法继续。
2）培养温度适宜
材料不同，对于培养温度的要求不同。人和哺乳动物细胞的最适生长温度为35～37℃。偏离这一温度，细胞的正常代谢和生长将会受到影响。MigakosniJ等在1979年就研究了高温对中国地鼠V-79细胞的影响。研究发现，41℃处理30～120min，对细胞无明显损伤作用，但高于43℃时细胞存活率急剧下降。Yonezawa等（1996）观察了高温对培养的大鼠恶性纤维组织细胞瘤（MHF）细胞的影响。结果表明，41℃对细胞无影响，42～43℃可引起细胞凋亡，44℃可引起细胞坏死。高温主要从以下几个方面对细胞产生不良影响：①导致酶的变性而失活，细胞代谢停止；②破坏细胞膜类脂质成分，使细胞膜渗透性发生变化而死亡；③引起核分裂异常；④破坏纺锤体，使核分裂停止在中期；⑤使细胞钙释放，激活使细胞凝集的酶。偏离最适温度的低温对细胞的影响相对较小。一般仅引起细胞代谢减缓，而不会导致细胞死亡。
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